酶免elisa试剂盒原理原理ELISA试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。
往预先包被小鼠胰岛素(INS)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并*洗涤。
用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。
颜色的深浅和样品中的小鼠胰岛素(INS)呈正相关。
用酶免elisa试剂盒测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
现举一系列稀释样品后,计算结果。
样品收集、处理及保存方法: 1.血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2.血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝,3000转离心30分钟取上清。
3.保存:如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70 °C保存,避免反复冷冻。
尽可能的不要使用溶血或高血脂血。
如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。
不要在37°C或更高的温度加热解冻。
应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
4.细胞上清液:3000转离心30分钟去除颗粒和聚合物。
5.应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
6.标本收集、处理及保存方法: 1.血清:全血标本请于室温放置2小时或4°C过夜后于1000转离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20°C或更高的温度检测,但应避免反复冻融。
2.血浆:可用EDTA、肝素-20或枸橼酸钠作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8°C 1000转离心