试剂盒原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。
往预先包被人IgM抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并*洗涤。
用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。
颜色的深浅和样品中的人IgM呈正相关。
用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
样本处理及要求1. 血清:将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4°C过夜,然后1000×g离心20 分钟,取上清即可,或将上清置于-20°C或-80°C保存,但应避免反复冻融。
2. 血浆:用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30分钟内于2-8°C1000×g离心15分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20°C或-80°C保存,但应避免反复冻融。
3. 组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,在冲洗的过程中,组织是否均匀。
将组织加入适量生理盐水捣碎。
将标本放于-20°C或-80°C保存,但应避免反复冻融。
4. 结果判定:当结果判定为阴性时,应在适当的稀释时间内结果。
5. 检验技师应具有从事实验室操作的基本素质和实践经验。