犬粪包虫抗原检测试剂盒1、实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠粪包虫含量。
用纯化的犬粪包虫抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入粪包虫抗体:再与HRP标记的粪包虫抗体:形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过*洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。
颜色的深浅和样品中的粪包虫呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中小鼠粪包虫浓度。
2、加样方法:双抗体夹心法:对有关小鼠粪包虫抗体进行加样,分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。
空白孔加样品稀释液,待测样品孔中先加样品稀释液,然后再加待测样品。
加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3、加酶标抗体:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。
空白孔主要由微孔板与试剂孔底部两种动物细胞分裂而设计的洗板机。
洗板不*、操作时的洗板不规则、产生的危害极大。
4、加酶反响:大、小鼠粪包虫抗体分别与HRP标记的粪包虫抗体结合,形成蓝色复合物,进入OD值后将标准品或标准品中的大鼠粪包虫抗体重复洗涤3次。
加底物A、B各加一定稀释后,再加底物B、B,终止反应后加底物TMB终止反应。
TMB在含NaN3的TMB酶的催化下转化成黄色。
颜色的深浅和样品中小鼠粪包虫抗体的量呈比例关系。
用酶标仪在450nm波长