pcr扩增试剂盒本试剂盒仅供研究使用。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中pcr。
用纯化的pcr抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入 – l 抗体,再与HRP标记的L -1”抗体 ,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过*洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。
颜色的深浅和样品中的pcr呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度,通过标准曲线计算样品中pcr浓度。
试剂盒组成1 30倍浓缩洗涤液 20ml×1瓶 7 终止液 6ml×1瓶2 酶标试剂 1ml×1瓶 8 标准品(6 个标准品) 0.5ml×1瓶10 标准品稀释液 1.5ml×1瓶 11 封板膜 2张 6 显色剂A液 6ml×1瓶 12 密封袋 1个标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验,可将标本放于-20°C保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因 NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样 50µl,待测样品孔中先加样品稀释液 40µl,然后再加待测样品