体外磷酸化试剂盒采用水相磷酸化酶的方法测定体外磷酸的含量。
体外磷酸化试剂盒分为双抗体夹心法和夹心法。
双抗体夹心法适用于细菌人体内和孕妇的体外诊断。
双抗体夹心法中加入淀粉酶促反响后，颜色的深浅和样品中的磷酸呈正相关。
取适量磷酸溶液后，将酶标记在洁净的方针上，吸入微孔板中，轻轻敲击混匀，在波长:450nm处丈量OD值。
检测方法中加入的磷酸可以直接升高硅基物的活性，而且也可以直接升高硅基物的活性。
常用的沉淀法就是吸去、加热至水解或冷却沸点后再参加化学试剂。
在这种测定方法的同时也可以提高测定水平。
体外磷酸化试剂盒操作步骤如下: 取100ul加入50ul的试剂盒中100ul 加入50ul的酶标板中，37°C水浴锅、洗板、吸取样品。
洗涤时甩去孔内液体，加酶标板30 秒，甩去吸液瓶中液体后，取上清液，微量加样孔上清液轻轻混匀，在波长:650nm处丈量OD值。
用洗涤枪汲取液体，液体蒸馏水混匀，在加酶标板前摇匀，在波长:850nm处丈量O.D.值。
根据试剂盒的说明，各试剂浓度需进行滴定:滴定时将滴定液稀释至标准曲线中，再作一测定，即为滴定溶液的浓度。
再作一测定，即为滴定酶标仪(450nm)震荡反应。
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