尿液检测试剂盒进口大鼠尿液检测试剂盒英文名称:Disease Kit实验日期:10 min min使用范围:仅限科研范围内使用 目的:用不含碘物质的试剂盒替代传统的碱性磷酸盐缓冲液,使用过程中避免与其他相关蛋白发生化学反应,但避免产生相应的反应。
实验原理: 采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。
往预先包被蛋白质的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并*洗涤。
用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的蛋白质呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
样本处理及要求:1. 血清:全血标本请于室温放置2小时或4°C过夜后于1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20°C或-80°C保存,但应避免反复冻融。
2. 血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2-8° C1000g离心15分钟,或将标本放于-20°C或-80°C保存,但应避免反复冻融。
3. 组织匀浆:可用蒸馏水自行制造适宜的容器,超声破碎:将标本稀释至1-10倍,放于-20°C或-80°C保存,但应避免反复冻融。
注:标本溶血会影响后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。
检测操作: 建议:1. 待检方针可从双抗体夹心法(antibody-off-time of time,简称TGA)2. 包被形式:样本是动物和人体组织固定的微孔,检测用包被缓冲液对3. 检测反应:用抗体包被,缓冲液将样品溶解