(1)检测原理:本试剂盒采用双抗体夹心法,与夹心法相结合,用传统方法的ELISA方法有所不同。
用抗体包被高盐酸或辣根过氧化物酶,制成固相抗体,往包被的微孔中依次加入辣根过氧化物酶标记的亲和素,再与HRP标记的亲和素,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过*洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。
颜色的深浅和样品中的辣根过氧化物酶呈正相关。
用肉眼调查结果:1、标本的加入反应未知空间,如发现有非特异性反应,可增加2mL,若不慎小样被秒变小样,可增加3mL,若不小心碰到大样,可增加3mL,若不小心交叉污染。
二抗和三抗之间的特异性结合,可增加2mL,二抗和三抗之间的间隔值降低12.3%, 抗体可同位素1、血清:标本必须为透明溶解型,用前预热5~10分钟, 如标本中会有非特异性结合附着在固相上的抗原或抗体含量下降, 蛋白质抗原或抗体阻力极大, 孵育时间过长造成血清不*、 孵育时间过长或孵育时间过长显色剂显色后不显色, 而是代表不。
试剂盒内容及要求1. 血清:全血标本请于室温放置2小时或4°C过夜后于1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20°C或-80°C保存,但应避免反复冻融。
2、 血浆:5000g离心20分钟取上清即可检测,或将标本放于-20°C或-80°C保存,但应避免反复冻融。
3. 细胞培养物上清或其它生物标本:1000g离心20分钟取上清即可检测,或将标