检测原理:使用蒸馏水杀菌液将特异性抗体包被微孔板,然后在微孔板上清洗除掉残留液体及其它杂质。
用洗板机洗板时,每孔加入100μl的蒸馏水洗涤,再加入底物A、B,在带金属部分的微孔板上洗涤,不构成污染。
运用蒸馏水的目的是识别或储存洗涤液中的杂质或成分,与待测样品进行反应。
操作步骤:1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释;2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。
空白孔一般采用微孔板孔。
加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀;温育:用封板膜封板后置37°C温育30分钟。
洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除掉未用洗板机洗涤的洗涤液,其余各步操作相同。
每次加底物A液50μl,空白孔避光使用。
洗涤:每次加入底物B液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
显色:每孔先加入显色剂B液50μl,再加入显色剂C、B,在37°C避光使用。
终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
反应结束时蓝色立转黄色。
样本处理及要求:1. 血清:全血标本请于室温放置2小时或4°C后于1000 x g离心20分钟,取上清(若有沉淀,请再次离心)。
2. 血浆:可用