酶联免疫吸附实验试剂盒

  技术文章     |      2023-11-18

ELISA试剂盒使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人IgG是否存在聚合物。

实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人IgG。

用纯化的抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并*洗涤。

用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。

颜色的深浅和样品中的人IgG呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。

标本要1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。

若不能马上进行试验,可将标本放于-20°C保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。

在酶标包被板上标准品准确加样 50µl,待测样品孔中先加样品稀释液 40µl,然后再加待测样品 10µl(样品zui终稀释度为 5倍)。

加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

操作程序总结:计算以标准物的浓度为横坐标, OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓