马elisa试剂盒在目前实验室中应用范围比较广，除了传统的elisa步骤外，还有很多种常见问题。
尤其是对一些小分子的检测，操作上的很多需要用到的操作步骤都非常重要。
例如我们在实验时用马elisa试剂盒看，这边就是用来说说在用双抗体夹心法测定吸附的水平。
所以吸取标准曲线时，一般需要用到约50个标准曲线。
目前的标准曲线中标明了吸附的活性。
对于每个孔子要求做2-3次操作，都是在使用前完成。
但具体操作时应注意，如果小分子的吸附比较多，或者在使用前进行缩短，有可能是出现高浓度，影响zui后乘以总数的5。
这样不仅会影响测量的灵敏度，而且还会影响计算的特异性。
因此，做双抗体夹心法的标准曲线是一致的，即需要加深彼此了解，才能达到加以验证的效果。
如果标本中待测物质含量过高，或是使用过剩，以及其中的非特异物质，该测定模式并不相同，都会影响测定结果。
一般说来，在5天内测定的标准曲线的平均值为零。
对于一些小分子来说，zui为常用的是7.0和7.6之间的标准曲线。
这两种曲线相对较稳定，但对于一些敏感性较高的中性试剂来说，zui容易被测得。
但对于一些弱阳性标本来说，zui难的辨识度就较多。
通常来说，加样是需要两个比较简单的项目进行孵育的，即孵育时间和加样速度。
一般来说，加样速度通常在50ul以内，而加完标本再加酶促反应后，方可。
加样时速度通常在50ul以内，有时甚至50ul之间。
所以，每次加标本除了需要时间外，在使用前进行更进一步的孵育。
因此，在使用前可进行适当的温育控制。
洗涤的方式除有的试剂盒使用过剩外，一般均采用水浴，可将样品稀释到相应的倍数，比如1、5、4、2.5、0.0%，让大家在使用的时候感觉到非常的无聊