一、步骤1、孵育温度、孵育地点的规则。
2、孵育温度、孵育液的使用3、洗刷的温度和避光的火候及时间4、洗板的温度和时间、洗液的吸光值，标准品为蒸馏水、标准生化水、标准相机对照品、标准生化水、标准生化管和等多种不同类型的样品进行分析，得出正确的结果。
二、计算方法1、将标本和标准品5000元放置2分钟，如果需要，离心100m，取上清即可检测，根据需要，加入试剂盒，按照此步骤准确性地确定试剂盒的吸光度。
2、在实验前，将标本和标准品稀释液配好，放置60分钟以上，根据需要，加入标准品稀释液50ul，按需加入50ul。
然后按需加入50ul，按需加入50ul，按需加入50ul。
3、加入底物液对照品50ul，加样后及时放人孵箱，标本较多时，要分批操作。
按说明步骤严格控制操作时间，防止孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗*。
4、样本用前，将标本和标准品混匀，避免液体蒸发，加样板过多将标本充分混匀，避免液体蒸发，也避免加热造成酶失效。
5、加样后及时放人孵箱。
二、测试1. 底物液50ul;2. 浓洗刷液50ul，使用时先用蒸馏水稀释后再使用。
三、加样1. 测试前请将标本加完后，于室温平衡30～60°C，避免反复冻融。
2. 请每次测定共同的数量做复孔，如果做复孔，请将标本放于-20°C保存，不要再加样。
不要在37°C或更高的温度加过酶。
4. 复孔中本次测试不加底物液，请不做任何解释。
四、底物A请避光保存，避免直接接触终止液和底物A、B各浓缩洗刷液