谷氨酸检测试剂盒本试剂盒仅供研究使用。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中谷氨酸。
用纯化的谷氨酸抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入谷氨酸,再与HRP标记的谷氨酸抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过*洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。
颜色的深浅和样品中的谷氨酸呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中谷氨酸浓度。
标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验,可将标本放于-20°C保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
谷氨酸与辣根过氧化物酶结合物有必要接触新鲜。
血清或血浆标本宜在新鲜时检测。
如有细菌污染,菌体中可能含有内源性HRP,也会产生假阳性反应。
细胞内加入酶标记的酶标记抗体时,检测失控的DNA和RNA都应在冰上及时传染。
荧光显色液A应挥发,避免直接接触终止液B,避免产生气泡B。
加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量和样品量直接影响测定结果。
此外,底物B对光敏感,避免直接暴露于光下。
避免用手接触,有毒。
实验完成后应立即读取OD值。
20万份标准品请于2-8°C保存。
操作步骤1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
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