用ELISA模式做正式试验就是运用手艺操作，手艺洗板机，在酶联免疫吸附试验，运用双抗体夹心夹心法测定靶标。
用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验，每样本用一次反响板，包被的抗体与酶标记的抗原 结合，然后加到酶标孔的底部，再加到底部，以查看标本和酶标记的抗原 ，使之与固相抗体 结合，并固定在上面，zui后加酶标抗体的底物 ，而不再使用 酶标抗体 ，。
加底物显色深浅 与血清中的抗体 反应 深浅有关。
用酶标仪进行 反应后方可进行检测，根据需要适当调整标本和吸光度值，对标本进行稀释，使稀释后的标本与检测标本 中的抗体 反应 均相同。
加标本需注意: 1、血清:全血标本请于室温放置2小时或4°C过夜后于1000 rpm离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20°C或-80°C保存，但应避免反响。
2、血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000 nm 离心15分钟，或将标本放于-20°C或-80°C保存，但应避免反响。
3、细胞培养物上清或其它生物标本:1000 rpm离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20°C或-80°C保存，但应避免反响。
4、血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于2 或 1000 rpm离心15分钟，或将标本放于-20°C或-80°C保存，但应避免反响。
5、细胞培养物上清或其它生物标本:1000 rpm离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20°C或-80