检测试剂盒原理检测试剂主要有试剂盒板孔和试剂盒的两种类型。
试剂盒指将试剂盒从冷藏环境中取出的充分混合液体以作最终反应的物质,液体组分以作试剂盒的标本。
用纯化的蛋白质构成的试剂盒,混匀后,加入试剂盒上的标准品、HRP标记的试剂。
这两种试剂盒在制作中的运用上很有把握,并且可以根据需要选择合适的检测试剂盒进行操作。
一、试剂1、将试剂盒从冷藏环境中取出的充分混合液体将直接取出,取出后将反应板放于铺有湿布的密闭盒内干燥10min。
如果环境良好则说明试剂盒效果不错,并且可以直接在强酸性过氧化物酶的比色测定中检测出来。
2、将特异性的抗体或抗原吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。
吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4°C18~24小时。
蛋白质包被的zui适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,在其它试验条件相同时,观察阳性标本的OD值。
选择OD值zui大而蛋白量zui少的浓度。
对于多数蛋白质来说通常为1~10μg/ml。
3、样本制备要规范,每份样本运用进口原材料要规范,并且严格按说明书要求保存。
标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
4、各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。
一次加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
5、请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。
如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔*孔的