如何检测elisaELISA检测试剂盒1. 血清:操作过程中避免任何细胞刺激。
使用不含热原和内毒素的试管。
收集血液后,1000×g离心10分钟将血红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。
1000×g离心30分钟去除颗粒。
3. 细胞上清液:1000×g离心20分钟去除颗粒和聚合物。
4. 保存:如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70 °C保存,避免反复冷冻。
尽可能的不要使用溶血或高血脂血。
如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。
不要在37°C或更高的温度加热解冻。
应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
使用细胞裂解液时要尽量减少裂解液的种类和使用量。
5. 使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
6. 使用干净的塑料容器配置洗涤液。
使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
7. 洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
应想办法甩干未结合的液体,尤其是在临用前参加。
96孔板的吸光度需要达到40W/ml。
操作步骤1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品zui终稀释度为5倍)。
加样将样