ELISA试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA)。
往预先包被抗原或抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并*洗涤。
用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成黄色。
颜色的深浅和样品中的抗体是呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值)，计算样品浓度。
样本处理及要求1. 血清:将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4°C过夜，然后1000×g离心20 分钟，取上清即可，或将上清置于-20°C或-80°C保存，但应避免反复冻融。
2. 血浆:用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的30分钟内于2-8°C1000×g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20°C或-80°C保存，但应避免反复冻融。
3. 组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M， pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果)，称重后将组织剪碎。
将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。
推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。
为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。
后将匀浆液于5000×g离心5~ 10分钟，取上清检测。
4. 细胞培养物上清或其它生物标本:请1000×g离心25分钟，取上清即可检测，或将上